内源性CoIP实验中的一些小tips（详细步骤见图2）❗ 1️⃣如果细胞长满了但没时间做，可以用PBS洗两遍后放-80保存 2️⃣内源性IP抗体和磁珠很重要，抗体最好是说明书已经明确说了可以用于IP实验，如果没有也可以预实验试一下；磁珠要选择结合效率高的，可以减少非特异结合，我们组用的是辉骏生物 proteinA/G磁珠（货号FI8302），很好用！磁珠孵育那步只需要2h即可，IP的结果很好[吧唧R]3️⃣如果混匀仪位置不够，可以将EP管放入50mL离心管 4️⃣洗脱时用IP裂解液将Loading buffer稀释成1×，加30μL洗脱磁珠，上样时加2-5μL即可 内源性CoIP与外源性的区别见图1～ 如何选择哪种CoIP❓ ✅追求结果的生理真实性和可靠性，并且有高质量的内源性抗体时，首选内源性Co-IP。这是证明两个蛋白在细胞内天然相互作用的“金标准”证据。 ✅当需要进行快速筛选、功能域定位、突变研究，或者内源性抗体效果不佳/不存在时，选择外源性Co-IP。