1. 研究背景与目的

在生物制品（如疫苗）的生产与质量控制中，包装密封完整性不仅是关键质量属性，更是维持产品效价和无菌性的生命线。常规的单一静态压力测试难以模拟产品在冷链运输中经历的周期性温度与压力波动。本研究提出一种动态压力循环测试方法，旨在利用MIT-L20的精密压力控制能力，更真实地评估疫苗用西林瓶包装在复杂应力下的密封可靠性。

2. 具体技术方案与实施流程

2.1 实验设计

研究对象：采用灌装培养基并经终端灭菌的2R中硼硅玻璃西林瓶，配备溴丁基橡胶塞及铝塑组合盖，封装工艺参数完全模拟实际生产。

挑战模式：采用正压与负压交替循环的应力模式。每个循环包括：正压保持 → 泄压 → 负压保持 → 恢复常压。此设计旨在模拟空运（低气压）与陆路运输震动（内部液体冲击产生瞬态高压）的复合效应。

阳性对照：使用激光打孔技术制造标称直径为Φ5μm的微孔缺陷样品，用于验证方法的灵敏度与挑战有效性。

2.2 仪器配置与参数设定

使用MIT-L20微生物侵入密封试验仪作为核心加压/抽真空设备。具体参数通过工业级触摸屏进行编程设置：

循环参数：设定压力上限为 +150 kPa（模拟内部应力），压力下限为 -60 kPa（模拟高空低压）。单次保压时间设定为 300秒，以允许微生物在压差驱动下有足够迁移时间。

循环次数：根据模拟的运输时长，设定总循环次数为 50次。

控制精度：仪器0.5级的测试精度与0.01kPa的压力分辨率，确保每个循环的压力条件具备高度重现性。

2.3 测试执行与微生物挑战

压力循环：将测试样品组（含无缺陷样品与阳性对照样品）置于测试腔。启动程序后，仪器自动执行预设的50次压力循环。其国际知名品牌气动元器件确保了在频繁的压力切换中，系统密封稳定，无压力泄漏或波动。

浸没暴露：循环测试结束后，立即将所有样品完全浸没于浓度为 1×10⁸ CFU/mL 的缺陷短波单胞菌（Brevundimonas diminuta）悬浮液中。菌液浸没时间延长至 90分钟，以增加挑战的严苛度。

表面去污：采用经验证的过氧化氢雾化熏蒸法对样品外表面进行彻底去污，消除假阳性干扰。

2.4 培养分析与数据管理

将处理后的样品置于 30-35℃ 培养箱中培养 7天。

结果判读：

测试组：无缺陷样品应全部显示无菌生长，证明其包装密封系统能耐受设定的压力循环应力，完整性未受破坏。

阳性对照组：Φ5μm缺陷样品应显示100%的微生物侵入率，确认挑战模型有效，且该方法能够可靠检测出微生物级别泄漏。

数据完整性：MIT-L20自动记录的完整压力-时间曲线数据，可通过其存储与查询功能导出，结合多级用户权限管理，确保了从实验操作到数据审核的全流程可追溯性与合规性。

3. 技术优势与结论

本方案展示了MIT-L20在超越常规单点测试方面的技术潜力。通过其一体式正负压设计和高精度可编程控制，实现了对包装系统施加复杂、动态的机械应力，从而：

提升验证相关性：所施加的压力循环条件更贴近产品在真实供应链中遇到的压力环境，使密封性评估更具预测价值。

发现潜在失效：动态应力可能诱发密封材料的疲劳或弹性密封界面的“泵吸”效应，有助于识别在静态测试中可能无法暴露的潜在泄漏风险。

提供决策依据：为包装材料选择、密封工艺参数优化以及运输条件风险评估提供了强有力的实验数据支持。

本技术方案适用于对密封完整性有极高要求的生物制品、高级别无菌制剂及需要经历复杂物流环节的药品包装开发与质量研究。